总磷，正磷工作曲线的绘制(抗坏血酸法)

电力18讯：    一.试剂和溶液

1.浓硫酸及C(1/2H2SO4)=0.5 mol/l    2.过硫酸铵     3.抗坏血酸     4.甲酸

5.乙二胺四乙酸二钠      6.磷酸二氢钾      7.酒石酸锑钾

8.钼酸铵溶液:称6.0克钼酸铵溶于约500ml水中,加入0.2克酒石酸锑钾及83ml浓硫酸,冷却后稀释至1升,混匀储存于棕色瓶中备用

9.抗坏血酸溶液:称取17.6克抗坏血酸溶于500ml水中,加入0.2克乙二胺四乙酸钠及8ml甲酸,用水稀释至1升,混匀,储存于棕色瓶中备用

10.过硫酸铵溶液:称取6克过硫酸铵于250ml容量瓶中,加水稀释至刻度,此溶液含过硫酸铵0.12g/5ml

11.磷标准溶液(母液):称取0.7165克预先在110---105°C干燥过的磷酸二氢钾溶于水中，并移入1升容量瓶中，用水稀释至刻度摇匀备用，此溶液浓度为1ml=0.5mgPO43-

12.正磷工作液：用移液管吸取10ml磷标准液溶于500ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀备用，此溶液浓度为1ml=10ugPO43-，供绘制正磷标准曲线使用

13.总磷工作液：用移液管吸取20ml磷标准液于500ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀备用，此溶液浓度为1ml=20ugPO43-供绘制总磷标准曲线使用

二.曲线绘制

1.正磷标准曲线：取8个50ml容量瓶依次加入0，1，2，3，4，5，6，7ml正磷工作溶液，其浓度分别为1，0.2，0.4，0.6，0.8，1.2，1.4mg/l，各加入约20ml水，5ml钼酸铵溶液，3ml抗坏血酸溶液，然后用水稀释至刻度，摇匀，在25--30°C下放置10分钟，以试剂空白为对照，将分光光度计调零，用该仪器714nm波长和3cm比色皿，测定吸光度，以50ml标准溶液PO43-的浓度ml/l为横坐标，对应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线

2.总磷标准曲线：取6个50ml容量瓶依次加入0，0.5，0.7，0.9，1.1，1.3ml总磷工作液，其浓度分别为0，0.2，0.28，0.36，0.44，0.52mg/l，各加入约20ml水，5ml酸铵溶液及3ml抗坏血酸溶液，用水稀释至刻度，摇匀，在25--30°C下放置10分钟，以试剂空白为对照，将分光光度计调零，用该仪器714nm和3cm比色皿测定吸光度，以50ml标准溶液PO4 3-  的浓度mg/l为横坐标，对应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线